Nøgleforskel - HPLC vs LCMS
Lad os først se på betydningen af HPLC og LCMS, før vi analyserer forskellen mellem HPLC og LCMS. Kromatografi er en separationsteknik i kemisk analyse, hvor prøvebestanddele adskilles under passage gennem et kromatografisk medium. Det involverer også interaktion med prøve, stationær fase og mobil fase. HPLC står for højtydende væskekromatografi, og det bruges som en væskekromatografimetode i analytisk kemi. Kombinationen af væskekromatografi og massespektroskopi (LCMS) er udviklet til kvantitativ analyse af udvalgte biomolekyler, og det er en meget følsom, nøjagtig og specifik assayprocedure sammenlignet med HPLC. Dette er nøgleforskellen mellem HPLC og LCMC. Denne artikel introducerer dig til HPLC og LCMC, der beskæftiger sig med kemisk analyse og diskuterer forskellene mellem HPLC og LCMS.
Hvad er HPLC?
Højtydende væskekromatografi (HPLC) er en populær separationsteknik inden for analytisk kemi. Det bruges hovedsageligt til at adskille komponenterne, til at identificere og kvantificere hver komponent i en blanding. Tidligere var denne metode kendt som højtryksvæskekromatografi, fordi den var afhængig af pumper for at flyde et flydende opløsningsmiddel under tryk omfattende prøveblandingen gennem en søjle pakket med et fast adsorberende materiale. Hver eneste bestanddel i prøveblandingen interagerer forskelligt med det faste adsorberende materiale, hvilket resulterer i forskellige strømningshastigheder for forskellige bestanddele. Dette kan føre til adskillelse af bestanddelene, når de strømmer ud af HPLC-søjlen.
HPLC er blevet brugt til forskellige anvendelser, såsom analyse af vitamin D-niveauer i blod, ulovlig stofbrug af atleter ved at detektere lægemiddelrester i deres urin, sortering af bestanddelene i en kompleks biologisk prøve til forskningsformål og analyse og fremstilling af lægemidler.
Hvad er LCMS?
Flydende kromatografi – massespektrometri (LCMS) er en analytisk teknik, der kombinerer de fysiske separationsevner ved væskekromatografi med masseanalyseringsevnerne ved massespektrometri (MS). Væskekromatografi er en separationsteknik, og massespektrometri bruges til at analysere masse-til-ladningsforholdet mellem ladede partikler. Den fysiske adskillelse opnås normalt ved HPLC og alternativt LCMS også kendt som HPLC-MS. LCMS er en dominerende analytisk teknik, der har en meget høj nøjagtighed, følsomhed og specificitet sammenlignet med HPLC. Således er det nyttigt i mange applikationer såsom forskningsformål, lægemiddelanalyse, fødevareanalyse osv. LCMS bruges hovedsageligt til at adskille, til at detektere, identificere og kvantificere biokemiske egenskaber af en bestemt prøve i nærværelse af komplekse kemiske blandinger.
Hvad er forskellen mellem HPLC og LCMC?
Forkortelse og definition af HPLC og LCMC
HPLC: HPLC står for højtydende væskekromatografi. Det er en separationsteknik, der hovedsageligt bruges til at adskille komponenterne, til at identificere og kvantificere hver komponent i en blanding.
LCMS: LCMS står for væskekromatografi og massespektrometri. Det er en analytisk teknik, der kombinerer de fysiske separationsevner ved væskekromatografi med masseanalysefunktionerne i massespektrometri (MS).
Karakteristika for HPLC og LCMC
Klassifikation
HPLC: Dette er kun en væskekromatografimetode.
LCMS: Dette er en kombination af metode til væskekromatografi og massespektrometri.
Effektivitet
HPLC: Sammenlignet med LCMS er HPLC-analysen mindre effektiv og langsommere.
LCMS: Sammenlignet med HPLC er LCMS-analysen effektiv og hurtigere.
Følsomhed
HPLC: Sammenlignet med LCMS er HPLC-analysen mindre følsom.
LCMS: Sammenlignet med HPLC er LCMS-analysen mere følsom.
Specificitet
HPLC: Sammenlignet med LCMS er HPLC-analysen mindre specifik.
LCMS: Sammenlignet med HPLC er LCMS-analysen mere specifik.
Nøjagtighed
HPLC: HPLC giver mindre nøjagtige resultater end LCMS til bestemmelse af nogle kemikalier.
LCMS: LCMS giver mere nøjagtige resultater end HPLC til bestemmelse af nogle kemikalier.
Komponent
HPLC: HPLC kan betragtes som en komponent i LCMS.
LCMS: LCMS kan ikke betragtes som en komponent i HPLC.
Ion kilde
HPLC: Ionkilde findes ikke i HPLC-instrument.
LCMS: Ionkilden findes i LCMS-instrumentet.
Ansøgninger
HPLC: Ioner, polymerer, organiske molekyler og biomolekyler kan analyseres ved hjælp af HPLC.
LCMS: Organiske molekyler og biomolekyler kan analyseres. I modsætning til HPLC kan LCMS bruges til at undersøge ufuldstændigt opløste blandinger.
Operation
HPLC: Diagrammet for et HPLC-instrument er vist i figur 1, og det inkluderer normalt en autosampler, pumper og en detektor. Prøveudtageren introducerer prøveblandingen i den mobile fase (blanding under tryk af opløsningsmidler, såsom vand, acetonitril og / eller methanol), som overfører den til søjlen. Pumperne leverer den ønskede strømning og sammensætning af den mobile fase gennem søjlen. Søjlen er fyldt med adsorbenten, som er en kornet fast partikel, såsom silica eller polymerer. Detektoren frembringer et signal, der er proportionalt med mængden af prøvebestanddelens tilstedeværelse i søjlen, hvilket muliggør kvantificerbar analyse af de valgte prøvebestanddele. HPLC-instrumentet styres, og dataanalyse leveres af en digital mikroprocessor og brugersoftware.
Figur 1: Diagram over HPLC-instrument
LCMS: Diagrammet for LCMS-instrumentet er vist i figur 2. Prøveekstrakten indsættes i kolonnen bestående af HPLC. Denne søjle bevarer prøve-metabolitter baseret på fysiske tegn, og forskellige metabolitter strømmer til massespektrometeret ved forskellige tidsintervaller. Massespektroskopi bruges til at vurdere masser af partikler, til bestemmelse af elementernes arrangement af et molekyle og til afklaring af molekylstrukturer. Imidlertid skal prøven ioniseres til generering af ladede molekyler for at bestemme deres masse-til-ladnings-forhold. Derfor består LCMS i stedet for HPLC-instrumenter yderligere tre moduler såsom jernkilde, en masseanalysator og en detektor. En ionkilde kan omdanne gasfaseprøve til ioner og en masseanalysator, der grupperer ionerne efter deres masser ved hjælp af elektromagnetiske felter. Langt om længe,en detektor kvantificerer værdierne og leverer data for hver ion, der er til stede i prøven. LCMS-teknikken kan bruges til både kvalitative og kvantitative applikationer.
Figur 2: Diagram over LCMS-instrument
Som konklusion er HPLC en væskekromatografimetode, mens LCMS er en kombination af væskekromatografi og massespektrometri. Begge disse analyseteknikker har forskellige karakteristika, men de kan bruges til at identificere og kvantificere fødevaresammensætninger, lægemidler og andre bioaktive molekyler.
