Nøgleforskel - HPLC vs HPTLC
Hovedforskellen mellem HPLC og HPTLC er, at HPLC tillader kvantitativ adskillelse af komponenter i en prøve, mens HPTLC ikke tillader kvantitativ adskillelse af komponenter i en prøve.
Kromatografi er en fysisk separationsmetode, der bruges til at adskille og identificere komponenterne i en blanding. Både HPLC og HPTLC er kromatografiske teknikker. HPLC er højtydende væskekromatografi. HPTLC er tyndtlagskromatografi med høj ydeevne.
INDHOLD
1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er HPLC
3. Hvad er HPTLC
4. Sammenligning side om side - HPLC vs HPTLC i tabelform
5. Oversigt
Hvad er HPLC?
HPLC er højtydende væskekromatografi. Det er en analytisk teknik, der bruges til at adskille, identificere og kvantificere komponenter i en blanding. I denne teknik opløses prøven i et egnet opløsningsmiddel. Derefter ledes opløsningsmidlet med prøven gennem en pumpe med et givet tryk. Pumpen er fyldt med fast adsorberende materiale. Derefter binder nogle komponenter sig stærkt til det absorberende materiale, mens andre komponenter binder løst. Dette får komponenterne til at have forskellige strømningshastigheder gennem pumpen. Derfor kan komponenterne let adskilles.
Figur 01: Et HPLC-system
Det adsorberende materiale, der fylder pumpen, er kendt som den stationære fase. Opløsningsmidlet med den opløste prøve er kendt som den mobile fase. Pumpen, der anvendes i denne teknik, kaldes søjlen. Søjlen er fyldt med et adsorberende materiale, oftest silicapartikler. Størrelsen på disse partikler kan variere fra 2-50 um. Adskillelsesprocessen påvirkes af sammensætningen af den mobile fase og systemets temperatur. Interaktionerne mellem den stationære fase og komponenten i prøven kan være hydrofobe interaktioner, dipol-dipolinteraktioner, ionbinding osv.
HPLC's driftstryk er betydeligt højere end ved traditionel væskekromatografi. Det ligger omkring 50-350 bar. Forskellen mellem væskekromatografi og HPLC er, at ved væskekromatografi falder prøven gennem søjlen under tyngdekraften, mens prøven i HPLC er under tryk gennem søjlen. Søjlens størrelse og de absorberende partikler er også meget små sammenlignet med traditionel væskekromatografi. Den opløsning, der gives ved hjælp af HPLC-teknikken, er imidlertid overlegen.
Hvad er HPTLC?
HPTLC er tyndtlagskromatografi med høj ydeevne. Det er den avancerede og automatiserede form for traditionel TLC. Denne teknik giver en effektiv opløsning i en kort periode. I denne analysemetode kan prøven og en reference analyseres på samme tid, hvilket gør det muligt at sammenligne prøven med referencen. Det giver en forbedret analytisk nøjagtighed end andre kromatografiske teknikker. Det tager mindre tid at tage analysen. Teknikken er en billig teknik.
Figur 02: En analyse af fødevarefarvestoffer ved hjælp af HPTLC
HPTLC-metoden er en simpel proces, og prøveforberedelsestrinet elimineres også (i traditionel TLC er prøveforberedelsestrinet inkluderet inden adskillelsen. Dette trin involverer rengøring og berigelse). Opløsningsmidlet kan anvendes direkte uden forbehandling, skønt andre kromatografiske teknikker kræver forbehandlinger såsom afgasning, filtrering osv.
Det adsorberende materiale, der anvendes i HPTLC, er silica med meget små partikelstørrelser. I traditionel TLC er partikelstørrelsen af silica 5-20 um, mens den i HPTLC er 4-8 um. Prøven påføres HPTLC-pladen ved hjælp af en applikator. Det giver en ensartet og sikker anvendelse. Derefter placeres pladerne i et kammer med den mobile fase. Kammeret skal være mættet med dampen fra den mobile fase. Efter HPTLC-processen kan de pletter, der er flyttet, opdages. Når detekteres pletterne på pladen, bruger HPTLC-teknikken et passende UV-område eller et jodkammer.
Hvad er forskellen mellem HPLC og HPTLC?
Diff artikel midt foran bordet
HPLC vs HPTLC |
|
| HPLC er højtydende væskekromatografi. | HPTLC er tyndtlagskromatografi med høj ydeevne. |
| Teknik | |
| I HPLC føres den mobile fase med opløsningsmidlet gennem en søjle fyldt med den stationære fase. | I HPTLC spottes prøven på en TLC-plade og placeres inde i et kammer indeholdende den mobile fase; derefter får prøven lov til at migrere opad på pladen sammen med den mobile fase. |
| Måling | |
| I HPLC bruges forskellene mellem strømningshastigheder af komponenter gennem søjlen til at adskille komponenterne i prøven. | I HPTLC bruges forskellene mellem afstandene, som hver komponent i prøven har tilbagelagt, til at adskille komponenterne i prøven. |
| Kvantitativ adskillelse | |
| HPLC tillader kvantitativ adskillelse af komponenter i en prøve. | HPTLC tillader ikke kvantitativ adskillelse af komponenter i en prøve. |
Resumé - HPLC vs HPTLC
HPLC og HPTLC er to kromatografiske teknikker. Hovedforskellen mellem HPLC og HPTLC er, at HPLC tillader kvantitativ adskillelse af komponenter i en prøve, mens HPTLC ikke tillader kvantitativ adskillelse af komponenter i en prøve.
