Nøgleforskel - Transformanter vs rekombinanter
Rekombination og transformation er to afgørende trin i genteknologi, hvor en organisms egenskaber bevidst modificeres ved at manipulere dens genetiske materiale. Rekombination er en proces, hvor fremmed DNA inkorporeres i et vektorgenom, og der dannes rekombinant DNA-molekyle. Transformation er det næste trin, hvor rekombinant molekyle indføres i værtsorganismen. Værtscellen eller organismen letter ekspression af det rekombinante molekyle. Hovedforskellen mellem transformanter og rekombinanter er, at transformanter er cellerne eller organismerne, der tager rekombinant molekyle indeni og letter ekspression, mens rekombinanter er de vektorer, der tillader indsættelse af det fremmede DNA i dets genom og transporteres til værtstransformanter til ekspression.
INDHOLD
1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er transformanter
3. Hvad er rekombinanter
4. Sammenligning side om side - Transformanter vs rekombinanter
5. Resumé
Hvad er transformanter?
Transformanter er cellerne eller organismerne, hvori rekombinant DNA optages til ekspressionen. Bakterier bruges almindeligvis som værtsorganismer i genteknologi, da de er lette at dyrke, formere sig og håndtere under laboratorieforhold, og transformationsprocessen er let sammenlignet med andre organismer. Den mest populære værtsbakterie, der anvendes i genteknologi, er bakterie E coli.
Under transformationsprocessen induceres værtsceller til at optage rekombinanterne. Imidlertid optager nogle værtsceller ikke rekombinante molekyler. De er kendt som ikke-transformatorer, og cellerne, der indeholder rekombinante DNA-molekyler indeni, er kendt som transformanter. Udvælgelse af transformanter fra ikke-transformanter udføres ved hjælp af valgbare markører i molekylærbiologi. Valgbare markører indsættes i vektorgenomet sammen med DNA-insertet. Almindeligt anvendte selekterbare markører er antibiotikaresistente gener. Markørgener letter differentieringen af transformanter og fortsætter processen. Efter transformationsprocessen dyrkes bakterien i et medium indeholdende antibiotika. Kun transformanterne er i stand til at vokse på dette medium, da de besidder rekombinanterne indeni.
Når det rekombinante DNA-molekyle er transformeret inde i værtsorganismen, kan det fremmede DNA enten integreres i værtscellegenomet eller forblive ikke-integreret i cytoplasmaet. Imidlertid forekommer ekspressionen og replikationen af det fremmede DNA i værtsorganismen og producerer det ønskede resultat ud fra processen.
Hvad er rekombinanter?
En rekombinant er en organisme eller en celle, der har rekombineret genom indeholdende fremmed DNA. Rekombinanter er et resultat af den genteknologiske proces. De er kunstigt konstrueret in vitro ved at indsætte generne af interesse og modificere genomet. Ofte fungerer bakterieplasmider og bakteriofager som rekombinanter i genteknologi. Det har kimærer af forskellige DNA'er. Rekombinant DNA-molekyle bærer fremmed DNA til værtsorganismen og får det til at udtrykke og danne det ønskede produkt.
Rekombinante molekyler konstrueres ved anvendelse af restriktionsendonukleaser og DNA-ligaser. Det ønskede DNA-fragment adskilles fra den oprindelige organisme og indsættes i vektoren for at gøre rekombinanten til transformation. Opskæring af genet af interesse og åbning af vektororganismen skal udføres ved hjælp af det samme restriktionsenzym for at skabe kompatible klæbrige ender for at forbinde dem sammen. Når først det fremmede DNA er inkorporeret i vektorgenomet, er det kendt som rekombinant eller det rekombinante DNA-molekyle.
Figur 02: Rekombinant DNA
Hvad er forskellen mellem transformanter og rekombinanter?
Diff artikel midt foran bordet
Transformanter vs rekombinanter |
|
| Transformanter er cellerne, der har rekombinant DNA-molekyle indeni. | Rekombinanter er bærermolekyler, der har fremmed DNA indsat i eget genom. |
| Ekspression af fremmed DNA | |
| De er værtscellerne, som er i stand til at udtrykke det rekombinante DNA. | De skal være i stand til at replikere sig selv i værtsorganismen. |
| Udvælgelse | |
| Celler, som let kan dyrkes og formere sig, vælges som værtsceller. | De skal være let udtrækkelige og skal indeholde markører, der kan vælges. |
Resumé - Transformanter vs rekombinanter
Transformanter er cellerne eller organismerne med rekombinante DNA-molekyler inde i dem. Rekombinanter er de organismer eller celler, der har gennemgået genetisk rekombination og har fremmed DNA inden for deres genomer. Bakterieceller anvendes ofte som værtsceller til transformation, og plasmider og bakteriofager anvendes ofte som vektorer i rekombinant DNA-teknologi. Dette er forskellen mellem transformanter og rekombinanter.
