Nøgleforskel - Flowcytometri vs FACS
I forbindelse med celleteori er celler den grundlæggende strukturelle og funktionelle enhed for alle levende organismer. Cellsortering er en metode, der bruges til at adskille forskellige celler i henhold til de fysiologiske og morfologiske træk. De kan have intracellulære eller ekstracellulære egenskaber. Interaktion mellem DNA, RNA og proteiner betragtes som intracellulære interaktive egenskaber, mens form, størrelse og forskellige overfladeproteiner betragtes som ekstracellulære egenskaber. I nutidens videnskab har cellesorteringsmetoder ført til at hjælpe de forskellige undersøgelser i biologiske studier og også til etablering af nye principper gennem forskning i medicin. Cellesortering udføres på forskellige metoder, der inkluderer både primitiv med mindre udstyr og avancerede teknologiske metoder med brug af sofistikerede maskiner. Flowcytometri, fluorescerende aktiveret cellesortering (FACS), magnetisk celleudvælgelse og enkeltcellsortering er de vigtigste anvendte metoder. Flowcytometri og FACS er udviklet til at differentiere celler i henhold til deres optiske egenskaber. FACS er en specialiseret strømningscytometri. Flowcytometri er en metode, der anvendes under analyse af en heterogen population af celler i henhold til forskellige celleoverflademolekyler, størrelse og volumen, som muliggør undersøgelse af enkeltceller. FACS er en proces, hvor en prøveblanding af celler sorteres i henhold til deres lysspredning og fluorescensegenskaber i to eller flere beholdere. Dette er nøgleforskellen mellem flowcytometri og FACS.
INDHOLD
1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er flowcytometri
3. Hvad er FACS
4. Ligheder mellem flowcytometri og FACS
5. Sammenligning side om side - flowcytometri vs FACS i tabelform
6. Resumé
Hvad er flowcytometri?
Flowcytometri er en metode, der bruges til at undersøge og bestemme ekspressionen af intracellulære molekyler og celleoverfladen og til at definere og karakterisere forskellige celletyper. Det anvendes også til bestemmelse af cellevolumen og cellestørrelse og til at evaluere renheden af underpopulationer, der er isoleret. Dette tillader multi-parameter evaluering af enkeltceller på omtrent samme tid. Flowcytometri bruges til at måle intensiteten af fluorescens, som produceres på grund af fluorescensmærkede antistoffer, som hjælper med at identificere proteiner eller ligander, der binder til associerede celler.
Figur 01: Flowcytometri
Generelt omfatter flowcytometri hovedsageligt tre undersystemer. De er fluidik, elektronik og optik. I flowcytometri er fem hovedkomponenter tilgængelige, som bruges til cellesortering. De er en strømningscelle (en strøm af væske, der bruges til at transportere dem og tilpasse cellerne til optisk detekteringsproces), et målesystem (kan være af forskellige systemer, herunder kviksølv- og xenonlamper, vandkølet med høj effekt eller luftkølede lasere eller diodelasere med lav effekt), en ADC; Analog til digital konverteringssystem, forstærkningssystem og en computer til analyse. Erhvervelsen er den proces, hvormed dataene indsamles fra prøverne ved hjælp af flowcytometer. Denne proces formidles af en computer, der er forbundet med flowcytometeret. Softwaren, der findes i computeren, analyserer informationen, der føres til computeren fra flowcytometeret. Softwaren har også evnen til at justere parametre for eksperimentet, der styrer flowcytometeret.
Hvad er FACS?
I sammenhæng med flowcytometri er fluorescensaktiveret cellesortering (FACS) en metode, der anvendes til at differentiere og sortere en prøve af en blanding af biologiske celler. Cellerne er adskilt fra to eller flere beholdere. Sorteringsmetoden er baseret på de fysiske træk ved cellen, som inkluderer lysspredning og fluorescensegenskaber for cellen. Dette er en vigtig videnskabelig teknik, som kan bruges til at opnå pålidelige kvantitative og kvalitative resultater af fluorescenssignaler, der udsendes fra hver celle. Under FACS oprindeligt den forud opnåede blanding af celler; en suspension ledes mod midten af en smal væskestrøm, der flyder hurtigt. Væskestrømmen er designet til at adskille cellerne i suspensionen baseret på diameteren af hver celle. En vibrationsmekanisme påføres suspensionens strøm, hvilket resulterer i dannelsen af individuelle dråber.
Figur 02: FACS
Systemet er kalibreret for at skabe en enkelt dråbe med en celle. Lige før dannelsen af dråber bevæger strømningssuspensionen sig langs et fluorescensmåleapparat, som detekterer fluorescenskarakteristikken for hver celle. På tidspunktet for dannelse af dråber placeres en elektrisk ladningsring, som en ladning induceres til ringen før målingen af fluorescensintensiteten. Når dråberne først er dannet fra suspensionstrømmen, fanges en ladning inde i dråberne, som derefter kommer ind i et elektrostatisk afbøjningssystem. Ifølge afgiften leder systemet dråberne i forskellige beholdere. Metoden til anvendelse af afgiften varierer alt efter forskellige systemer, der anvendes i FACS. Udstyret, der anvendes i FACS, er kendt som en fluorescensaktiveret cellesorterer.
Hvad er ligheden mellem flowcytometri og FACS?
Flowcytometri og FACS er udviklet til at differentiere celler i henhold til deres optiske egenskaber
Hvad er forskellen mellem flowcytometri og FACS?
Diff artikel midt foran bordet
Flowcytometri vs FACS |
|
| Flowcytometri er en metode, der anvendes under analyse af en heterogen population af celler i henhold til forskellige celleoverflademolekyler, størrelse og volumen, som muliggør undersøgelse af enkeltceller. | FACS er en proces, hvor en prøveblanding af celler sorteres i henhold til deres lysspredning og fluorescensegenskaber i to eller flere beholdere. |
Resumé - Flowcytometri vs FACS
Cellen er den grundlæggende strukturelle og funktionelle enhed for alle levende organismer. Cellesortering er den proces, hvormed celler isoleres og differentieres i forskellige kategorier baseret på deres intracellulære og ekstracellulære egenskaber. Flowcytometri og FACS er to vigtige metoder i cellesortering. Begge processer er udviklet til at differentiere celler i henhold til deres optiske egenskaber. Flowcytometri er en metode, der anvendes under analyse af en heterogen population af celler i henhold til forskellige celleoverflademolekyler, størrelse og volumen, som muliggør undersøgelse af enkeltceller. FACS er en proces, hvor en prøveblanding af celler sorteres i henhold til deres lysspredning og fluorescensegenskaber i to eller flere beholdere. Dette er forskellen mellem flowcytometri og FACS.
Download PDF-versionen af Flow Cytometry vs FACS
Du kan downloade PDF-version af denne artikel og bruge den til offlineformål som pr. Citatnote. Download venligst PDF-version her Forskellen mellem flowcytometri og FACS
