Hovedforskel - kapillær elektroforese vs gelelektroforese
Elektroforese er en teknik, der bruges til at adskille biomolekyler baseret på partikelladning, partikelstørrelse og partikelform. Migrationen af molekylet, kendt som elektroforetisk mobilitet, afhænger af typen af anvendt polymer / gel, dets porestørrelse, den tilførte spænding, driftstid og forholdet mellem overflade og volumen. Der er forskellige typer elektroforeseteknikker baseret på den anvendte type biomolekyle. Den første type elektroforese, der blev opfundet, var papirelektroforese, hvor et nitrocellulosepapir blev brugt som medium til adskillelse af biomolekyler. Princippet om gelelektroforese, hvor forskellige geler med porestørrelse blev brugt til at adskille biomolekyler, blev opfundet senere. Gelelektroforeseteknik blev yderligere modificeret for at forbedre nøjagtigheden af teknikken, og en sådan modifikation er kapillærelektroforese. Hovedforskellen mellem kapillærelektroforese og gelelektroforese er, at gelelektroforese udføres i et lodret eller vandret plan ved anvendelse af en polymergel med standard porestørrelse, hvorimod kapillærelektroforese udføres i et kapillarrør med en polymervæske eller en gel.
INDHOLD
1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er gelelektroforese
3. Hvad er kapillærelektroforese
4. Ligheder mellem kapillærelektroforese og gelelektroforese
5. Sammenligning side om side - Kapillærelektroforese vs gelelektroforese i tabelform
6. Resumé
Hvad er gelelektroforese?
Gelelektroforese er en teknik, der hovedsageligt adskiller nukleinsyrer, proteiner eller aminosyrer baseret på dets ladning, størrelse og form. Denne teknik bruger en fysisk gel, som er et polymer stof, som separationsmedium. Mest anvendte geler er agarose (til nukleinsyreseparation) og polyacrylamid (til proteinseparation). Gelelektroforetisk apparat indeholder gelstøbningsbakken til forberedelse af gelen, støbningskamme til forberedelse af brøndene, buffertank, elektroder - positive (anode) og negative (katoder) og spændingsforsyningsenheden. Molekyler som DNA eller RNA, som er negativt ladede, bevæger sig fra katoden til anoden, og molekyler, som er positivt ladede, bevæger sig omvendt. Gelforberedelse udføres i henhold til kravet. Hvis der kræves en høj opløsning eller adskillelse af molekyler,en gel med høj koncentration med en mindre porestørrelse skal fremstilles. Molekylerne adskilt på gelmatricen observeres efter en farvningsteknik. De adskilte molekyler vises som bånd på gelmatricen.
Figur 01: Gelelektroforese
Gelelektroforese anvendes i molekylær diagnostik såsom DNA-fingeraftryk til at bestemme tilstedeværelsen af et bestemt DNA / RNA-fragment eller et protein. Gelelektroforese bestemmer også renheden af den ekstraherede prøve af biomolekyle. Gelelektroforese udføres som et indledende trin til ind- og hybridisering og som en bekræftende analyse efter sekventering.
Hvad er kapillær elektroforese?
Kapillærelektroforese er en modifikation af gelelektroforese, der bruger det samme separationsprincip baseret på ladning, molekylets størrelse, men udføres i et kapillarrør med enten et gelstof eller en flydende polymer. Kapillærer fremstilles af kondenseret silica, og hvert kapillarrør har en indvendig diameter på 50-100 μm og er 25-100 cm lang. Prøver injiceres i kapillarrøret indeholdende polymermaterialet og adskilles meget hurtigt end den konventionelle gelelektroforese. Kapillarsystemet er godt beskyttet inde i en isoleringskappe, der beskytter prøven mod enhver forurening. Kapillærer kan fyldes med flydende polymerer, såsom hydroxyethylcellulose eller geler med høj opløsning, såsom polyacrylamid. Kapillærelektroforese giver større opløsning; derfor er adskillelse mere nøjagtig. Kapillærelektroforese bruger et automatiseret detektorsystem via spektrofotometrisk analyse. Dette skyldes det højere forhold mellem overfladeareal og volumen.
Figur 02: Kapillær elektroforese
Kapillærelektroforese anvendes i situationer som i retsmedicin, hvor højere nøjagtighed er påkrævet og ikke almindeligvis anvendes, da det er dyr teknik.
Hvad er ligheden mellem kapillærelektroforese og gelelektroforese?
- Adskillelse af molekyler i begge teknikker er baseret på molekylets ladning og størrelse.
- Begge teknikker kan bruges til at adskille både nukleinsyrer og proteiner.
- Prøvevolumenet for begge teknikker er det samme.
- Begge teknikker bruger en buffer til at lette adskillelse.
Hvad er forskellen mellem kapillærelektroforese og gelelektroforese?
Diff artikel midt foran bordet
Kapillærelektroforese vs gelelektroforese |
|
| Kapillærelektroforese er en teknik, der adskiller biomolekyler på et kapillarrør ved anvendelse af et flydende eller gelpolymermedium. | Gelelektroforese er en teknik, der adskiller biomolekyler på et lodret eller vandret plan ved hjælp af et polymergelmedium. |
| Adskillelse | |
| Ved kapillærelektroforese udskilles der inde i et kapillarrør. | I gelelektroforese sker adskillelse på et lodret eller vandret plan. |
| Separationsmedium | |
| Flydende polymerer som hydroxyethylcellulose anvendes i kapillærelektroforese. | Geler, enten agarose eller polyacrylamid, anvendes som et medium i gelelektroforese. |
| Krydsforbindelse | |
| Høj opløsning kan opnås ved kapillær elektroforese. | Opløsningen har lav gelelektroforese. |
| Forhold mellem overfladeareal og volumen | |
| Forholdet mellem overflade og volumen har høj kapillærelektroforese. | Forholdet mellem overflade og volumen har lav gelelektroforese. |
| Detektionsteknik | |
| Detektion udføres gennem spektrofotometriske automatiserede detektorer i kapillærelektroforese. | Farvning og observation gennem UV-transilluminator udføres som påvisningsteknikker i gelelektroforese. |
Resumé - kapillær elektroforese vs gelelektroforese
Molekylær diagnostik spiller en vigtig rolle i den videnskabelige verden. Identifikation og oprensning af DNA, RNA og proteiner er kritiske trin i de diagnostiske procedurer. Elektroforese er en teknik, der adskiller og identificerer biomolekyler i både gelelektroforese og den meget avancerede kapillærgelelektroforese. Gelelektroforese udføres i et lodret eller vandret plan ved anvendelse af en polymergel med standard porestørrelse, hvorimod kapillærelektroforese udføres i et kapillarrør med en polymervæske eller en gel. Dette er forskellen mellem kapillærelektroforese og gelelektroforese. Efter afslutningen af elektroforeseteknikken behandles biomolekylerne yderligere for at opnå information på højere niveau via hybridisering eller gennem teknikker såsom fingeraftryk.
Download PDF-version af kapillær elektroforese vs gelelektroforese
Du kan downloade PDF-version af denne artikel og bruge den til offlineformål som pr. Citatnote. Download venligst PDF-version her Forskellen mellem gelelektroforese og kapillær elektroforese.
