Nøgleforskel - Gram Stain vs Culture
Gramfarvning er en farvningsteknik, der udføres for at differentiere bakterier i to grupper i henhold til tykkelsen af peptidoglycanlaget i deres cellevæg. Kultur er en metode til dyrkning og vedligeholdelse af mikroorganismer under laboratorieforhold til forskellige analyser. Hovedforskellen mellem gram plet og kultur er deres funktion; gram stammer en farvningsteknik af bakterier, hvor kultur er en metode til dyrkning og vedligeholdelse af mikroorganismer.
INDHOLD
1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er Gram Stain
3. Hvad er Culture
4. Sammenligning side om side - Gram Stain vs Culture
5. Resume
Hvad er Gram Stain?
Gram plet er en vigtig differentiel farvningsteknik, der anvendes til bakteriel identifikation i mikrobiologi. Denne teknik blev introduceret af den danske bakteriolog Hans Christian Gram i 1884. Gramfarvning kategoriserer bakterier i to hovedgrupper: grampositive og gramnegative; disse er meget vigtige i bakterieklassificering og identifikation. Gramfarvning udføres som et indledende trin til bakteriekarakterisering.
Bakterier er grupperet baseret på forskellene i deres cellevæg. Grampositive bakterier indeholder et tykt peptidoglycanlag i deres cellevæg, mens gramnegative bakterier indeholder et tyndt peptidoglycanlag i deres cellevæg som vist i figur 01. Resultatet af gramfarvningen vil være baseret på tykkelsesforskellen i peptidoglycan-laget af cellevæg.
Figur 1: Grampositive bakterier og Gram-negative bakterier
Gramfarvning udføres under anvendelse af fire forskellige reagenser, nemlig; primær plet, mordant, affarvningsmiddel og modplet. Krystalviolet og safranin tjener som henholdsvis den primære og modpletterne, mens gram jod og 95% alkohol tjener som henholdsvis mordant og affarvningsmiddel.
Grundlæggende trin i gram plet
- En bakteriel udstrygning forberedes på et rent glasglas, varmefikseres og afkøles.
- Udstrygning oversvømmes med krystalviolet i 1-2 minutter.
- Udstryg skylles med langsomt rindende vand fra hanen for at fjerne overskydende pletter.
- Gramjod påføres udstrygningen i 1 minut.
- Udstryg skylles med langsomt rindende vand fra hanen
- Udstrygning vaskes med 95% alkohol i 2-5 sekunder og skylles med langsomt rindende vand fra hanen.
- Udstrygning er kontrastfarvet med safranin i 1 minut
- Udstryg skylles med langsomt rindende vand fra hanen, tørres og observeres under mikroskopet.
I slutningen af gramfarven observeres gramnegative bakterier i lyserød farve, mens de grampositive bakterier observeres i lilla farve som vist i figur 02. Resultatet af gramfarven bestemmes af tykkelsen af peptidoglycanlaget i deres cellevæg. Under affarvningstrinnet fjernes primær plet og mordanten let fra de gramnegative bakterier og bliver farveløse, da de har et tyndt peptidoglycanlag. Den primære plet bevares i de gram-positive bakterier, da de har et tykt peptidoglycanlag. Modplet vil ikke være effektiv for gram-positive bakterier på grund af fastholdelsen af den primære plet. Så gram-positive bakterier vil være synlige i primær pletfarve, dvs. lilla farve. Modplet pletter de gramnegative bakterier og vil være synlige i farve, som er safraninfarven. Derfor er det let at kategorisere bakterier i to grupper efter gramfarven, og det er værdifuldt i bakteriedifferentiering og identifikation.
Figur 2: Gramstamme
Hvad er kultur?
Mikrobiel kultur er en metode til dyrkning og vedligeholdelse af mikroorganismer under laboratorieforhold til forskellige formål. Kulturer dyrkes i faste, halvfaste og flydende medier baseret på typen og formålet med mikroorganismedyrkning. Kulturer forsynes med nødvendige næringsstoffer og vækstbetingelser, der kræves af mikroorganismerne. Der er forskellige komponenter i et dyrkningsmedium, såsom energikilde, kulstofkilde, nitrogenkilde, mineraler, mikronæringsstoffer, vand, størkningsmiddel osv. Optimal temperatur, ilt og pH bør justeres i henhold til typen af den mikroorganisme, der dyrkes.
Der er forskellige typer mikrobielle kulturer; for eksempel batchkultur, kontinuerlig kultur, stabkultur, agarpladekultur, bouillonkultur osv. Ifølge sammensætningen af vækstmediet er der forskellige typer kulturmedier kendt som syntetiske medier, halvsyntetiske medier og naturlige medier. Mikrobielle kulturer fremstilles under sterile forhold inde i et specielt kammer kaldet laminær luftstrøm. Vækstmedium og glasvarer steriliseres inden inokulering af den ønskede mikroorganisme. Under passende sterile betingelser overføres målmikroorganisme til det steriliserede næringsmedium og inkuberes ved optimal temperatur. Inde i mediet vil mikroorganisme vokse og formere sig ved hjælp af de medfølgende næringsstoffer.
Figur 3: En bakteriekultur på plade
Hvad er forskellen mellem Gram Stain og Culture?
Diff artikel midt foran bordet
Gram Stain vs Culture |
|
| Gramsstamme er en differentiel farvningsteknik, der anvendes til bakteriedifferentiering og identifikation. | Mikrobiel kultur er en metode til dyrkning af mikroorganisme i laboratoriet. |
| Komponenter | |
| Dette bruger forskellige reagenser inklusive to pletter. | Dette bruger forskellige dyrkningsmedier såsom faste, halvfaste og flydende medier sammensat af næringsstoffer og andre nødvendige forhold. |
| Grundlæggende funktioner | |
| Dette tillader gruppering af bakterier i to grupper: gram negative og gram positive. | Dette muliggør multiplikation af mikroorganismer til forskellige formål. |
| Grundlag | |
| Gram-pletudfald er baseret på forskellene i peptidoglycan-laget af cellevæggen. | Mikroorganismer vil vokse og formere sig inde i kulturmediet. |
| Resultat | |
| Gramnegative bakterier er synlige i lyserød farve og gram positive bakterier er synlige i lilla farve. | På plader kan man se kolonier af mikroorganismerne. På flydende medier er mikroorganismer i suspenderet form. |
Resumé - Gram Stain vs Culture
Mikrobielle kulturer fremstilles og vedligeholdes under laboratorieforhold til forskellige formål, såsom opbevaring, testning, kemisk oprensning osv. Gramfarvning er en farvningsmetode, der differentierer bakterier i to hovedgrupper kaldet gramnegative bakterier og gram positive bakterier. Derfor er forskellen mellem gramfarven og kulturen, at gramfarvning er en farvningsteknik for bakterier, mens kulturen er en metode til dyrkning og vedligeholdelse af mikroorganismer i laboratorierne.
