Nøgleforskel - CFU vs MPN
Kolonidannende enhed (CFU) og mest sandsynligt antal (MPN) er to metoder, der bruges til at tælle mikroorganismer i prøver. Begge parametre bruges til at detektere vandkvalitet og fækale indikatorbakterier i vandprøver. Kolonidannende enhed er et mål, der bruges til at tælle antallet af levedygtige bakterieceller eller svampeceller i specifikt volumen eller vægt af en given prøve. Standardenheden for denne parameter er CFU / ml eller CFU / g. Mest sandsynlige antal er en anden enhed, der bruges til at måle antallet af levedygtige bakterieceller i en flydende prøve. Hovedforskellen mellem CFU og MPN er, at CFU beregnes ud fra bakterie- og svampekolonier, der vokser på en solid agarplade, mens MPN beregnes ud fra levedygtige bakterier, der vokser i et flydende medium.
INDHOLD
1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er CFU
3. Hvad er MPN
4. Sammenligning side om side - CFU vs MPN i tabelform
5. Resumé
Hvad er CFU?
Colony forming unit (CFU) er en parameter, der måler antallet af levedygtige bakterie- eller svampeceller i en given prøve. Metoden, der tæller kolonidannende enheder, betegnes som standardpladetælling. De levedygtige kolonier, der vises på agarpladerne, udtrykkes som CFU pr. 1 ml (kolonidannende enhed pr. Milliliter) af prøven for væsker eller CFU pr. 1 g (kolonidannende enhed pr. Gram) af prøven for faste stoffer.
Der er to almindelige metoder, der bruges til at måle CFU i en prøve. De spredes plademetoden og hældeplademetoden. Disse to metoder understøttes af en teknik kaldet seriefortynding. Seriefortyndede prøver muliggør opnåelse af et tælleligt antal kolonier på agaroverfladen. Et kendt volumen prøve kan spredes på overfladen af en agarplade eller blandes med agar og hældes på en plade. Pladen inkuberes derefter, og de opståede kolonier tælles. Antallet af kolonier vedrører antallet af mikroorganismer i den originale prøve. Pladerne, der viser for mange kolonier eller for få kolonier, er udelukket fra at tælle, fordi resultaterne muligvis ikke er statistisk nøjagtige på disse plader. Statistisk set er det bedste interval 30 - 300 kolonier på en agarplade. Derfor skal de korrekte plader vælges for nøjagtig optælling. Seriefortynding udføres for ovenstående funktion.
Når du tæller antallet af levedygtige kolonier på plader, kan CFU / ml beregnes ved hjælp af følgende ligning.
CFU pr. Ml original prøve = antal kolonier på en plade X fortyndingsfaktor
Fortyndingsfaktor = (1 / Fortynding af pladen)
For eksempel, hvis du får 149 kolonier på pladen med 10-4 fortyndingen, kan antallet af bakterier i 1 ml af den oprindelige prøve beregnes som følger:
CFU / ml = (149) x (1/10 -4)
= 149 × 104 eller 1490000
= 1. 49 x 106
Figur 01: Kolonidannende enhed
Hvad er MPN?
Det mest sandsynlige tal er en alternativ foranstaltning til CFU / ml. MPN estimerer også de levedygtige celler i en flydende prøve. Det tæller organismer, der vokser i en flydende kultur, og er en overvejende bakteriologisk teknik. Denne metode er især nyttig til prøver, der indeholder lave koncentrationer af bakterieceller; f.eks. mælk, drikkevand osv. MPN-værdi udtrykkes for 100 ml volumen. MPN er afhængig af en statistisk metode baseret på sandsynlighedsteori. Der er statistiske tabeller designet til at finde MPN-værdier pr. 100 ml af prøven. Disse tabeller viser resultaterne ved 95% konfidensgrænser.
MPN-værdi beregnes efter udførelse af en teknik kaldet multipelrørsgæringsmetode. Tre sæt rør indeholdende et egnet dyrkningsmedium podes med tre forskellige volumener af prøven, såsom 10 ml, 1 ml og 0,1 ml og inkuberes til vækst. Efter inkubationsperioden scorer rørene + (positive) eller - (negative) for tilstedeværelse eller fravær af vækst. Mønsteret for positive og negative resultater sammenlignes derefter med en MPN-tabel med statistiske sandsynligheder for at estimere antallet af mikroorganismer. Derefter angives MPN-værdi for 100 ml af prøven. MPN bruges i vid udstrækning til at detektere coliforme bakterier til stede i vandprøver.
Figur 02: MPN-tabel
Hvad er forskellen mellem CFU og MPN?
Diff artikel midt foran bordet
CFU vs MPN |
|
| CFU er et mål, der bruges til at udtrykke antallet af levedygtige bakterie- eller svampekolonier i en given prøve. | MPN er et alternativ til CFU og måler antallet af levedygtige bakterieceller i en flydende prøve. |
| Enhed | |
| CFU / ml eller CFU / g | MPN / 100 ml |
| Beregning | |
| CFU beregnes ved at tælle antallet af kolonier dyrket på agarplader. | MPN beregnes ved at sammenligne positive og negative mønstre af rørene med MPN statistiske tabel. |
| Seriefortyndingsteknik | |
| Seriefortynding udføres, før prøverne placeres på agarplader. | Seriefortynding udføres normalt ikke, når MPN beregnes |
| Metoder | |
| Spredningsplademetode og hældeplademetode er to typer metoder, der udføres for at opnå CFU. | Fermentering af flere rør er metoden, der udføres for at opnå MPN-værdi. |
Resumé - CFU vs MPN
Det er nødvendigt af mange årsager at måle den mikrobielle vækst. I fødevareforarbejdningsanlæg er det nødvendigt at måle niveauet og typen af mikroorganismer i fødevarer. I fødevareindustrien og medicin er det nødvendigt at sikre, at steriliseringsbehandlinger anvendes effektivt. I rensningsanlæg er det nødvendigt at tage mikrobielt antal rutinemæssigt. Når man optimerer proceduren i molekylærbiologi, er det nødvendigt at måle antallet af kolonier på plader. Derfor er der forskellige metoder til optælling og vækstmåling til rådighed. CFU og MPN er to sådanne metoder, der er vidt udbredte inden for forskellige områder. CFU er et mål for antallet af levedygtige bakterie- og svampekolonier, der er til stede i en given prøve. Det beregnes ved hjælp af standardmetode for pladetælling eller levedygtig tællemetode. MPN er et andet mål, der udtrykker antallet af bakterieceller til stede i et givet volumen af den flydende prøve. Det beregnes ved hjælp af flere rør gæringsmetoder og MPN tabel. Dette er forskellen mellem CFU og MPN.
Download PDF-version af CFU vs MPN
Du kan downloade PDF-version af denne artikel og bruge den til offlineformål som pr. Citatnotater. Download venligst PDF-version her Forskellen mellem CFU og MPN.
